嘔吐毒素的危害和限量標(biāo)準(zhǔn)及快速定量檢測方法嘔吐毒素主要成分為DON(deoxynivalenol),是一種單端孢霉烯族的化合物,主要是來自于鐮刀菌屬,包括為禾谷鐮刀菌和黃色鐮刀菌。
嘔吐毒素DON對于糧食谷物類的污染狀況與產(chǎn)生毒素的菌株、溫度、濕度、通風(fēng)、日照等因素有關(guān)。主要污染物有小麥、大麥、燕麥、玉米等谷類作物;面包、餅干、麥制點(diǎn)心等糧食制品;動(dòng)物的奶、蛋中等。小麥赤霉病主要分布在潮濕溫帶地區(qū),我國大部分地區(qū)又處于這一地帶,所以造成嘔吐毒素DON污染較嚴(yán)重,而在多雨年份地區(qū)污染狀況則更為嚴(yán)重,這給飼料企業(yè)以及養(yǎng)殖業(yè)主帶來了很大的損失,人們食用含有嘔吐毒素的食物會(huì)危害到人體健康。
一、嘔吐毒素的理化特性：
嘔吐毒素(DON),又被稱脫氧雪腐鐮刀菌烯醇,化學(xué)名為3α, 7α, 15一三羥基草鐮孢菌-9-烯-8-酮,是一種單端孢霉烯的族化合物。而單端孢霉烯族毒素一共有150多種,嘔吐毒素(DON)是單端孢霉烯族毒素中最重要的一種毒素。
嘔吐毒素DON純品是一種白色針狀結(jié)晶,其結(jié)構(gòu)環(huán)為四環(huán)的倍半萜,分子量為296.3,熔點(diǎn)為151 ~153℃(醋酸乙基石油),嘔吐毒素DON易溶于極性的溶劑:如水、甲醇、乙醇、乙腈、乙酸乙酯、丙酮等,不溶于正已烷、丁醇、石油醚等。
嘔吐毒素DON耐熱,一般不會(huì)在加工、儲(chǔ)存以及烹調(diào)過程中被破壞;耐藏力強(qiáng),病麥經(jīng)四年貯藏,其中的嘔吐毒素DON仍能保留其原有的毒性,這使得在實(shí)驗(yàn)室條件下可長期貯存保持毒力不變的樣本;在弱酸中部不分解,但在加堿或高壓處理下,可破壞部分含有嘔吐毒素的谷物類加工產(chǎn)品;在甲醇中不穩(wěn)定,22天后可被轉(zhuǎn)化為其它產(chǎn)物。
二、嘔吐毒素對動(dòng)物和人的危害：
細(xì)胞毒性:(1)通過對磷脂雙層的滲透作用,作用于亞細(xì)胞水平層面;(2)通過細(xì)胞膜之間的相互作用;(3)通過自由基介導(dǎo)脂質(zhì)的過氧化作用。
免疫毒性:(1)可以形成對病原體免疫應(yīng)答的抑制;(2)可以造成自身免疫反應(yīng)的誘發(fā)。
三致作用:可能具有致癌、致畸、致突變作用,是一種潛在的隱形的致癌物質(zhì)。
2.1 嘔吐毒素對動(dòng)物的危害
單端孢霉烯族毒素都有可能引起鴨、貓、狗、豬、鴿子等不同動(dòng)物的嘔吐癥狀,動(dòng)物毒力學(xué)的一項(xiàng)試驗(yàn)研究表明:不同畜種的動(dòng)物對嘔吐毒素DON的敏感程度按順序是:豬>小鼠>大鼠>家禽和反芻動(dòng)物。
對嘔吐毒素最為敏感的動(dòng)物是豬,尤其敏感的是斷奶仔豬,豬對嘔吐毒素DON的敏感程度約為其他動(dòng)物的100-200倍。飼料中0.3~0.5mg/kg的毒素就會(huì)引起豬拒食、生長能力下降以及對傳染病的抵抗能力下降,飼料中含1mg/kg以上的嘔吐毒素就可能引起豬拒食、嗜睡、生長嚴(yán)重受阻、體增重減慢、免疫機(jī)能減退、喪失肌肉協(xié)調(diào)性以及嘔吐等癥狀。對生長較為肥育的豬而言,含有14mg/kg嘔吐毒素的飼料飼喂后10~20min即會(huì)出現(xiàn)嘔吐、不正常的焦慮和磨牙現(xiàn)象,嘔吐現(xiàn)象僅發(fā)生在第1天。而且嘔吐毒素含量在0~14mg/kg的試驗(yàn)中,飼糧中每增加1mg/kg嘔吐毒素,生長肥育豬的采食量減少6%,在含毒量10mg/kg以上即完全拒食。奶牛的健康狀況、產(chǎn)奶量、攝食量幾乎不受影響,牛奶中也檢測不到嘔吐毒素DON及其脫氧產(chǎn)物。
嘔吐毒素的急性毒性與動(dòng)物的種屬、年齡、性別、染毒途徑有關(guān),雄性動(dòng)物對毒素比較敏感。急性中毒的動(dòng)物主要表現(xiàn)為站立不穩(wěn)、反應(yīng)遲鈍、豎毛、食欲下降、嘔吐等,還可引起動(dòng)物的拒食反應(yīng),低劑量攝入會(huì)造成食欲下降、生長緩慢、發(fā)育不良和病死率升高等現(xiàn)象;大量或長期攝入會(huì)發(fā)生急性中毒、嘔吐、直腸出血和腹瀉,與腸道炎癥極其相似。嘔吐毒素對動(dòng)物機(jī)體毒性主要分為免疫毒性和細(xì)胞毒性。在很多物種上已經(jīng)得到證實(shí),嘔吐毒素DON可以通過胎盤轉(zhuǎn)移到胎兒。懷孕母豬感染嘔吐毒素DON后在胎兒的血漿、肝和腎中均檢測到嘔吐毒素DON。
2.2 嘔吐毒素對人類健康的危害
人類食用含有嘔吐毒素的糧油食品后,會(huì)出現(xiàn)胃部不適、眩暈、腹脹、頭痛、惡心、嘔吐,手足發(fā)麻、全身乏力、顏面潮紅、以及食物中毒性白細(xì)胞缺乏癥等癥狀。癥狀較為嚴(yán)重者可見呼吸、脈搏、體溫、血壓波動(dòng),四肢發(fā)軟、步態(tài)不穩(wěn),更為嚴(yán)重時(shí)損害造血系統(tǒng)造成死亡。
嘔吐毒素主要通過胃腸道吸收,經(jīng)血液循環(huán)進(jìn)入肝臟代謝后經(jīng)腎臟隨尿液排出,容易造成對各個(gè)器官的普遍損傷。而且嘔吐毒素在人體中的半衰期約為2～4h,代謝迅速,8h后就可能檢測不到嘔吐毒素和它的代謝物。
三、中國及主要國家對嘔吐毒素的限量標(biāo)準(zhǔn)
3.1、中國嘔吐毒素限量標(biāo)準(zhǔn) (飼料)
3.2歐盟嘔吐毒素限量標(biāo)準(zhǔn)(飼料)
3.3美國嘔吐毒素限量標(biāo)準(zhǔn)(飼料)
四、嘔吐毒素常用檢測方法
1、膠體金定性卡法：
是嘔吐毒素最簡便的檢測方法，檢測不需要配套儀器，樣品處理簡單，五到十分鐘就可以看到檢測結(jié)果?？梢愿鶕?jù)G、T線，初步確定所測樣本毒素含量范圍，但不能給出具體數(shù)值。價(jià)格最低、沒有國標(biāo)支持，適合企業(yè)初檢使用。
2、酶聯(lián)免疫吸附測定法：
依據(jù)該方法開發(fā)出來的嘔吐毒素檢測試劑盒，可以半定量的檢測樣品中嘔吐毒素的含量，目前國產(chǎn)試劑盒大量上市，價(jià)格適中，有國標(biāo)支持，適合中小型企業(yè)質(zhì)量控制，或者作為產(chǎn)品初步質(zhì)量控制。
3、免疫親和柱為分離手段：用高效液相色譜儀作為檢測工具的分析方法。該項(xiàng)技術(shù)靈敏度高，測定范圍廣泛，采用單克隆免疫技術(shù)，可以特效性地將嘔吐毒素和其他真菌毒素分離出來，分離效率和回收率高，正確性和可靠性強(qiáng)，有國標(biāo)支持。檢測成本高，儀器維護(hù)成本高。一般作為檢測機(jī)構(gòu)終端判定方法，也有大型企業(yè)作為產(chǎn)品質(zhì)量衛(wèi)生指標(biāo)控制方法。
4、膠體金定量分析卡法：是深圳市芬析儀器制造有限公司推出的光譜掃描吸峰方法，靈敏度高、結(jié)果可靠，可以和親和柱方法相媲美，檢測價(jià)格適中；有行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)支持。適合中大型企業(yè)作為產(chǎn)品質(zhì)量衛(wèi)生指標(biāo)控制。
5、液相或氣相串聯(lián)質(zhì)譜法：一般作為高端實(shí)驗(yàn)室實(shí)驗(yàn)檢驗(yàn)方法，主要作為研究或者國家部門對毒素情況監(jiān)測、風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估。
